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mcf是什么细胞

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大家好,我的质粒是6000多bp的,比较大,我想用它做基因转染,实验室有经验的都说太大了,不好转,连接在病毒上比较好转,但是那样的话,费用会贵得多,需要一万多块钱。大家有没有比较好的建议啊?用什么转染方法,什么转染试剂比较容易转进去?并且要转的细胞是免疫细胞,不容易提取和培养,转染试剂一般还都有细胞毒性,易杀伤细胞。哎,都急死我了。 , 我养的乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231按理说都属于比较好养的细胞,贴壁都不错。但是镜下观察大部分能贴壁但会有不少细胞漂浮,不贴壁,换了培养液第二天漂浮细胞又出现了。新生细胞有部分贴不上去,漂起来,培养液都是按照要求配的,消化后的胰酶都是清理干净的。现在...

怎么辨别hela和mcf-7细胞: 肯定有这些氨基酸啊

mcf7细胞复苏后多久能恢复状态: MCF7是人乳腺癌细胞
细胞复苏后多久能恢复状态要具体看培养基和培养环境是否适宜
一般来说MCF7复苏后会生长得稍微慢一些,正常的话mcf7细胞复苏后差不多需要1天左右能恢复状态

MCF-7细胞怎么也长不起来,形状也很怪: 染细菌了吧,重新配培养基,重新复苏细胞吧。

花色苷的药理研究:

花色苷的结构中有多个酚羟基,属于羟基供体,它在植物组织中的主要作用是保护植物中易氧化的成分。相关科研工作者们一般都从评价其清除自由基能力、还原力、抑制脂质体过氧化能力、生物抗氧化效应等几个体系或动物体试验来检测抗氧化性.研究表明.花色苷类色素对羟自由基、超氧自由基、DPPH、ABTS 等均有很好的清除作用,可防止大分子物质的氧化损伤,同时能激活抗氧化防御体系,对超氧化物歧化酶、谷胱甘肽酶等的活性有明显的促进作用.
花色苷抗氧化的途径主要有:①抑制自由基的产生或直接清除自由基。花色苷清除门由基的功能主要和它分子中的羟基有关,特别是3一位或3’-、4’-、5’-位羟基有关 。②激活抗氧化酶体系。通过激活过氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶等来达到抗氧化效果,而抗氧化酶的重要生理功能也任于其对自由基的清除作用。③与诱导氧化的过度金属络合.可以直接降低LDL的氧化程度,也可抑制Fenton反应起到抑制活性氧自由基产生的作用。 1、预防老年痴呆症
桑葚提取物能明显降低衰老,促进模型小鼠海马中βA4的含量,而βA4的形成与小鼠的学习能力、记忆力和认知能力的下降有直接的相关性;由此可知,桑葚提取物中花色苷成分的抗氧化活性及防止βA4形成能力应该是抑制小鼠衰老和痴呆的主要原因.
2、抗糖尿病
自然界中6种最为常见的花色苷中具有邻苯二酚结构的矢车菊素一3一葡萄糖苷和牵牛花色素一3一葡萄糖苷能更好的清除H2O2,诱导IR脂肪细胞胞内的ROS.同时显著提高胰岛素刺激后脂肪细胞对葡萄糖的摄取能力,均呈剂量一效应依赖关系。因此,郭红辉等认为花色苷可预防和改善氧化应激引起的3T3一L1脂肪细胞胰岛素抗性,且此效应与B环上的邻苯二酚结构有关。
3、保护血管、抗动脉粥样硬化
血管内皮细胞损伤是动
脉粥样硬化(As)发生的起始环节,而氧化型低密度脂蛋白(Ox—LDL)的形成是造成血管内皮细胞损伤、促进动脉粥样硬化发生发展的关键因素之一。Ox—LDL会被血管内壁巨噬细胞
上的清道夫受体识别而大量吞噬,造成细胞内胆固醇及胆固醇酯积聚,巨噬细胞在动脉壁内皮下层不断积累形成泡沫细胞,如在此基础上进一步发展则形成动脉粥样斑块。而花色苷作
为强抗氧化剂能够抑制LDL氧化从而预防As发生.
4、预防高血压
从玫瑰(Hisbiscus sabdari ffa)茄花萼中分离得到飞燕草素一3一接骨木二糖苷、矢车菊素一3一接骨木二糖苷2种花色苷,发现这2种花色苷是玫瑰茄花萼提取物抑制ACE(体内血管紧张素转换酶)的主要活性物质,且主要通过竞争活性部位而起到抑制的目的,从而起到降压的作用。
5、抗炎
不同产地的黑莓(Rubus idaeus)、黑覆盆子(Black beny)和红覆盆子(Raspbenv)的不同溶剂提取物有不同的抑制COX一2表达的作用,其中黑覆盆子的抑制效果最强,达7l% ,成分分析表明起作用的主要是花色苷类化合物.
6、抗突变、抗癌、抗肿瘤
黑莓(Rubws idaeus)中以矢车菊色素-3-0-葡萄糖苷等花色苷为主的黑莓提取物能抑制人体结肠直肠癌细胞HT-29、乳腺癌细胞MCF-7及血癌细胞HL-60的生长,其中对HT一29细胞的抑制效果最为明显,且抑制效果与浓度呈依赖关系。 由于花色苷能使夜问视力增强,在弱光条件下使视力提早适应,所以蓝莓(Sementrigonelbe)和欧洲越橘(Vaccinium mgrtillus)提取的花色苷在眼科中准用于夜盲症和糖尿病视网膜症的治疗。研究表明,蓝莓提取物的花色苷成分可促进视紫红质在暗处的再合成,而视紫红质受到光线对视网膜的刺激时可瞬间分解,并将该化学变化传送脑部,因而产生“可见物”,提高视网膜对光的感受性。另有报道认为花色苷对健康人眼睛疲劳也有良好的改善作用,这可能与花色苷对毛细血管的保护作用有关。

大家有没有比较好的建议啊?用什么转染方法,什么转染试剂比较容易转进去?: 6kb以上的确有点大,会影响转染效果
1.用脂质体和阳离子转染试剂。现在很多公司都有卖转染试剂的,你可以直接买转染试剂来进行转染。比如说最经典的lip2000,或者吉满生物的效果还行,主要是便宜。
2.可以尝试使用电转,但是对细胞伤害较大,需要专门的仪器。
3.慢病毒和腺病毒包装现在价钱在一万不到一些,主要还是看公司报价,你可以谈价钱。

mcf-7细胞做转染的时候细胞密度有多少: 义翘sinofection转染的时候,96孔板100微升体系是2×10E4 个细胞。

请教关于MCF-10A细胞: 人癌细胞/MCF7 其他相关: 人肾癌细胞 OS-RC-2 人胰腺癌细胞 PANC-1 人肝癌亚力山大细胞 PLC/PRF/5 人肺扁平上皮癌细胞 QG-56 人急性非B 非T 淋巴细胞白血病 Reh 人结肠腺癌细胞 RKO 人结肠癌转基因细胞 RKO-AS45-1 人结肠癌转基因细胞 RKO-。

细胞贴壁状体啊不理想: 解决方案如下:
1.如果你手上这支细胞已经传代次数很多的话,建议复苏一支新的细胞,这是最直接的方法
2.检查培养基、胰酶、pbs中是否有污染
3.如果只有手头上的细胞,那么检测一下是否有支原体或者病毒感染,黑胶虫实际是一种细胞残留的胶质成分并不是一种污染源但是视野中会有黑色点状物好像悬浮细胞但略小,注意区别
4.贴壁不佳可以在传代或复苏前选用包被液包被培养瓶,增加细胞贴壁性,一般用多聚赖氨酸包被,效果很好,可以一试
5.有时候细胞分裂是贴壁-悬浮-分裂-再贴壁的一个过程,悬浮细胞不一定都是死细胞,可能是正在分裂的细胞,一般来说贴壁好的细胞换液一次总会有大概5-15%再次悬浮,少量的话不必过分担心
补充你的问题:观察消化时间是以你的细胞在加入胰酶后变圆开始到细胞间连接消失细胞脱落为消化完成,消化时间过短镜下观察可能会有贴壁残留,消化过久会损伤细胞导致状态不佳,建议两步法消化,效率比较高,吹打以吹散细胞为目的不必太过用力,其实吹打对细胞的损伤相比胰酶是很小的,稍加注意即可

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